Влияние преаналитических факторов на алгоритм мультиплексного спектроскопического анализа образцов плаценты

Abstract

Цель. Оценка влияния преаналитической подготовки плаценты на результаты рамановской спектроскопии. Материалы и методы. Проспективно исследованы 30 образцов плаценты. Образцы исследовались при помощи спектрометра «ИнСпектр М» (ООО «РамМикс», Россия) на трех этапах преаналитической обработки материала: нативная ткань, после фиксации в формалине, после депарафинирования среза. Статистический анализ включал описательную статистику, тест Шапиро - Уилка, тест Фридмана с пост-хок тестом и корреляцию Спирмена. Результаты. Исследование образцов выявило 33 рамановских пика (415-2915 см-1), большинство из которых распределялись ненормально (критерий Шапиро - Уилка, p менее 0,05). Тест Фридмана с пост-хок тестом Дурбина - Коновера выявил группу стабильных аналитов: 19 аналитов сохранили интенсивность после фиксации, 6 - после депарафинирования, а 10 - на всех этапах обработки. Тест Спирмена выявил избирательные взаимосвязи между этапами обработки для отдельных аналитов (890, 1117, 1204, 753, 830 и 2225 см-1). Заключение. Исследование выявило значительное влияние преаналитической подготовки образцов на спектральные характеристики плацентарной ткани, перспективность клинического использования рамановской спектроскопии и необходимость разработки стандартизированных протоколов.Aim. To evaluate the effect of preanalytical processing of placental samples on the results of Raman spectroscopy. Materials and methods. Thirty placental samples were prospectively studied. The samples were examined using the InSpectr M spectrometer at three stages of preanalytical processing of the material: native tissue, after fixation in formalin, after deparaffinization of the section. Statistical analysis included descriptive statistics, the Shapiro - Wilk test, the Friedman test with the post-hoc analysis, and the Spearman's rank correlation. Results. The analysis of the samples revealed 33 Raman peaks (415-2,915 cm -1 ), most of which were distributed abnormally (Shapiro - Wilk test, p less 0.05). The Friedman test with the Durbin - Conover post-hoc analysis revealed a group of stable analytes: 19 analytes retained intensity after fixation, 6 - after deparaffinization, and 10 - at all processing stages. The Spearman's rank correlation revealed selective relationships between processing stages for individual analytes (890; 1,117; 1,204; 753; 830, and 2,225 cm-1). Conclusion. The study revealed a significant effect of preanalytical sample processing on the spectral characteristics of placental tissue, the prospects for the clinical use of Raman spectroscopy, and the need to develop standardized protocols.